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    Cre-LoxP 系统丨DIO-DO序列和CreERT2条件性重组系统

    07/15
    54


    Cre-LoxP系统



    上一期讲了CreLoxP系统诱导基因重组的方式以及CreLoxP系统LSL结构具体指什么?

    其中包括:序列删除;序列翻转;转染色体易位;序列互换。loxp-stop-loxp的LSL结构。

    今天继续为大家介绍DIO-DO序列与常规Loxp的区别和CreERT2条件性重组系统是什么?



    1


    DIO-DO序列


    引入两对不相容的反向Lox位点:LoxP、Lox2272和反向的目的基因,在这种结构下,任一对Lox位点间的序列会在Cre的作用下发生可逆的快速翻转,之后Cre重组酶马上不可逆地切割翻转后的同向Lox位点,只留下翻转后的基因和单独的LoxP、Lox2272位点,防止基因的再次翻转。只有Cre特异性表达的细胞可以正确表达目的基因,是就是DIO结构;

    DO结构请观看下方视频讲解~



    2


    CreERT2条件性重组系统


    在Cre元件的C端连接一段改造过的雌激素受体的配体结合域LBD,新的融合蛋白Cre-LBD和热休克蛋白90绑定在一起,由于热休克蛋白的阻挡,雌激素受体无法进入细胞核,只能游荡于细胞质内。当人工合成的激素分子结合到Cre-LBD受体后,蛋白构象改变并进入核内,介导基因重组。

    更多内容,请观看视频讲解~

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